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液相色谱柱的系统结构分析和维护方法
发布时间:2019-12-07   点击次数:98次
  液相色谱柱的系统结构分析和维护方法
 
  液相色谱柱进样系统:一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作,进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。
 
  液相色谱柱输液系统:该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l.47~4.4X107Pa,流速可调且稳定,当高压流动相通过层析柱时,可降低样品在柱中的扩散效应,可加快其在柱中的移动速度,这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存错和梯度仪,可使流动相随固定相和样品的性质而改变,包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值,或改用竞争性抑制剂或变性剂等。这就可使各种物质(即使仅有一个基团的差别或是同分异构体)都能获得有效分离。
 
  液相色谱柱分离系统:该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10~50cm,内径为2~5mm,由"不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成,住内装有直径为5~10靘粒度的固定相。固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成,它们都有惰性、多孔性和比表面积大的特点,加之其表面经过机械涂渍,或者用化学法偶联各种基因或配体的有机化合物。因此,这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性。
 
  液相色谱柱的维护
 
  1、使用预柱保护分析柱;
 
  2、尽量不超过该色谱柱的ph范围;
 
  3、避免流动相组成及极性的剧烈变化;
 
  4、流动相使用前必须经脱气和过滤处理;
 
  5、如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕柱子冲洗干净,并保存大乙腈中;
 
  6、压力升高是需要更换预柱的信号。
 

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